適應無血清培養基
許多連續細胞系,如HeLa,CHO-K1或小鼠骨髓廇可能可以適應于缺乏血清的生長環境.適應過程常常是一個很長的選擇周期,此間只有細胞群體中的少數被選擇出來,因此在此選擇過程中確保細胞系的性質不喪失是很重要的.如果是骨髓瘤細胞,其目的是用于制備雜交廇,而如果是CHO細胞則用于做轉染實驗,因此用無血清培養基的選擇培養必須在融合和轉染之前進行,使選擇過程中丟失特性的危險性降到zui低.
適應無血清培養基通常要經過幾次連續的傳代培養,使血清濃度逐漸降低.一旦細胞在某一血清濃度條件下形成穩定的增殖狀態,就可用更低濃度的血清將細胞傳代培養,直至穩定的生長增殖再次形成,而后再次稀釋血清.如果是懸浮培養,要計算活細胞的數量 ,根據活細胞的數量稀釋細胞懸液,此時需要保持的zui低細胞濃度要比正常傳代培養所需的細胞濃度高一些.對于單層細胞培養,可在傳代培養的前幾天先降低培養基中的血清濃度,而后再用新的低濃度培養基進行傳代培養.在適應過程中,可能有必要在培養基中添加一些已知的因子來代替血清.
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